1.背景技術(shù)
玻色因，化學名為羥丙基四氫吡喃三醇，分子式C8H18O5，分子量為192.21，具有良好的抗衰功效。玻色因可增加細胞及皮膚緊致度，還可幫助維持真皮彈性，預防皮膚老化。玻色因是一種木糖衍生物，它有多種立體異構(gòu)體，不同的異構(gòu)體特征對生物活性具有影響。玻色因為結(jié)構(gòu)特異性化合物，其結(jié)構(gòu)中含有多個手性碳原子，其中多為母核上的碳原子，但由于合成過程中起始物料結(jié)構(gòu)的特異性選擇，母核上的手性碳原子的空間排列是相對固定的，其中1位端基碳為β構(gòu)型，因而糖苷配基（羥基丙烷）中7位手性碳的構(gòu)型就成為決定羥丙基四氫吡喃三醇生物活性的關(guān)鍵。在不同非對映異構(gòu)體比例的生物活性對比研究中，認為dr=70/30的生物活性大于dr=50/50，其中dr表示非對映異構(gòu)體比例。
2.專利內(nèi)容
本發(fā)明提供一種突變型羰基還原酶，包括任意三個或三個以上的如下突變點：第22位，第68位，第92位，第125位，第151位，第202位，第216位，第234位，第242位中至少三個位點進行突變。經(jīng)篩選獲得BC-CR-8重組突變株（V22T、I68S、A92T、E125M、Y202A、E216M、N234G、G242R），將該突變型羰基還原酶用于催化β-丙酮木糖苷制備(R)-構(gòu)型玻色因，在10L轉(zhuǎn)化體系中，經(jīng)12h催化反應(yīng)，獲得得產(chǎn)物(R)-構(gòu)型玻色因1.65 kg。最終產(chǎn)品收率為82.5%，ee值99.8%。
3.發(fā)明意義
相較于化學法，生物酶催化合成(R)-構(gòu)型玻色因具有安全高效、成本低廉，立體選擇性專一且對環(huán)境友好的優(yōu)點。目前酶法催化制備(R)-構(gòu)型玻色因報道較少，本發(fā)明提供一種突變型羰基還原酶，利用異丙醇為氫供體，將β-丙酮木糖苷催化轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>(R)-構(gòu)型玻色因，該催化反應(yīng)生成的丙酮易揮發(fā)，更容易從反應(yīng)產(chǎn)物中除去，從而簡化了(R)-構(gòu)型玻色因的分離催化工藝。
